ISSN: 2376-0354
Клара Трамута, Даниэла Манила Бьянки, Элиза Баркуччи, Сандра Фрагасси, Саманта Лупи, Энрико Арлетти, Мелисса Биццарри и Люсия Декастелли
Лаборатории по безопасности пищевых продуктов полагаются на проверенные методы, которые обнаруживают скрытые аллергены в пищевых продуктах, чтобы гарантировать безопасность и здоровье потребителей, страдающих аллергией. Здесь мы представляем результаты испытаний для проверки и аккредитации анализа ПЦР в реальном времени (ОТ-ПЦР: SPECIAL finder MC Peanut, Generon) для обнаружения следов арахиса в пищевых продуктах. Метод был протестирован на пяти классах пищевых матриц: хлебобулочные и кондитерские изделия, мясо, готовые к употреблению и молочные продукты, зерновые и продукты помола. Холостые образцы были добавлены, начиная с образцов арахиса (Arachis hypogaea), лиофилизированных и хранящихся при -18 °C, в концентрации 1000 ppm. Затем были приготовлены серийные разведения с ДНК, извлеченной из холостых образцов, до конечной концентрации 0,5 ppm. Результаты: LOD 0,5 ppm в зерне и продуктах помола, готовых к употреблению, мясе, хлебобулочных и кондитерских изделиях (диапазон Ct 27-34); LOD 2,5 ppm в молочных продуктах (диапазон Ct 25-34). Для определения параметра исключительности метода матрица рагу была загрязнена Prunus dulcis (миндаль), Glycine max (соя), Sinapis alba (горчица), Apium graveolens (сельдерей), Allium cepa (лук), Pisum sativum (горох), Daucus carota (морковь) и Theobroma cacao (какао). Перекрестных реакций не наблюдалось. Точность метода была оценена как удовлетворительная по чувствительности (96%) и специфичности (100%) и была валидирована. Она была признана адекватной для нужд лаборатории, поскольку соответствует цели, для которой она применялась.
Данное исследование частично финансировалось в рамках проекта Министерства здравоохранения Италии (IZS PLV 02/19 RC).