Ферментная инженерия
Открытый доступ

Абстрактный

Высокоэффективный и контролируемый метод сульфатирования сложных углеводов

Чи-Вэй Чан

Сульфатированные гликозаминогликаны (ГАГ) являются важными биологическими молекулами, ряд из которых, например, гепарин, фондапаринукс натрия (ARIXTRA®) и пентозан полисульфат натрия (ELMIRON®), используются в клинической практике уже несколько десятилетий. Ключевым этапом в приготовлении гомогенных сульфатированных углеводов является эффективный, воспроизводимый и масштабируемый химический метод O- и N-сульфатирования. Значительная трудность, возникающая при попытках сульфатировать полифункциональные субстраты с использованием традиционных подходов, заключается в неполном превращении и непредсказуемом результате. В этой презентации мы описываем новый метод химического сульфатирования [1], успешно применяемый для O- и N-сульфатирования широкого спектра субстратов для синтеза библиотеки дискретных гомогенных фрагментов гепарансульфата от моно до октасахаридов, который был использован для выявления специфических связывающих взаимодействий чистых фрагментов ГАГ с белками и в металлоорганических комплексах [2,3,4]. В то же время мы использовали этот новый метод для получения библиотеки плотно сульфатированных миметиков ГАГ как мощных ингибиторов инфекции EV71 [5]. Мы также успешно расширили этот новый протокол для сульфатирования полиолового субстрата в масштабе 232 грамма в академической лаборатории и перенесли технологию на производство GMP (масштаб 7 кг) ведущего кандидата на лекарство, который в настоящее время проходит клинические испытания на людях для терапевтической разработки против сепсиса.