Журнал лейкемии
Открытый доступ

Абстрактный

Человеческие амниотические мезенхимальные стволовые клетки проявляют схожую иммуносупрессивную способность с мезенхимальными стволовыми клетками костного мозга и обладают более высокой пролиферативной активностью и более четкими свойствами стволовых клеток in vitro

Я Гао, Ин Сюй, Цзе Сун, Цзя-цюн Хун, Вэй-бинь Чжо, Чунь-янь Ян, Юй Чжан, Чжи-пин Фань, Ян-у Го, Чун-янь Юэ, Хай-тао Сунь и Бао-хун Пин

Цели: Мезенхимальные стволовые клетки костного мозга человека (hBMSC) использовались для профилактики и лечения острой реакции «трансплантат против хозяина» (aGVHD) у пациентов после трансплантации гемопоэтических стволовых клеток. В этом исследовании мы сравнили биологические характеристики и иммуносупрессивную активность амниотических мезенхимальных стволовых клеток человека (hAMSC) и hBMSC, чтобы предоставить экспериментальные доказательства потенциального использования hAMSC для лечения aGVHD, тем самым решив проблему недостаточного количества источников hBMSC. Методы: HAMSC были выделены путем ферментативного расщепления. hBMSC были выделены с использованием градиентов плотности Ficoll-Hypaque. Биологические характеристики обоих типов стволовых клеток были сравнены с помощью морфологического анализа, анализа роста клеток, профилирования клеточного цикла, иммунофенотипирования и иммунофлуоресцентного анализа. Было проведено совместное культивирование МСК и мононуклеарных клеток периферической крови (МНПК) in vitro, и пролиферация лимфоцитов была измерена с помощью набора для подсчета клеток Cell Counting Kit-8 (CCK-8). Продукция IFN-γ определялась в супернатанте совместной культуры с помощью иммуноферментного анализа (ИФА). Результаты: как hAMSC, так и hBMSC имели фибробластоподобную морфологию. hAMSC могли поддерживаться в течение как минимум 15 пассажей культуры, но hBMSC начали демонстрировать признаки старения и значительно снизили пролиферацию на 6-7 пассажах. Не было никакой существенной разницы в доле клеток в фазе G2/M между hAMSC и hBMSC (P>0,05). Иммунофенотипирование выявило положительную экспрессию CD105, CD90 и CD73 и отрицательную экспрессию CD34, CD45, CD11b, CD19 и HLA-DR на поверхности как hAMSC, так и hBMSC. hAMSC были положительными для Oct-3/4, но hBMSC — нет. И hAMSC, и hBMSC экспрессировали виментин. Пролиферация PBMC, стимулированная PHA, ингибировалась hAMSC и hBMSC. Это ингибирование было сильнее по мере увеличения доли MSC. Не было выявлено существенных различий между ингибирующими эффектами двух типов MSC на пролиферацию PBMC (P>0,05). Продукция интерферона-γ (IFN-γ) была ниже, когда PBMC совместно культивировались либо с hAMSC, либо с hBMSC, чем когда они культивировались отдельно (P<0,05). Продукция IFN-γ была ниже, когда PBMC совместно культивировались с hAMSC, чем когда они совместно культивировались с hBMSC (P>0,05). Заключение: Результаты этого исследования продемонстрировали, что hAMSC обладают более высокой пролиферативной активностью и более четкими свойствами стволовых клеток, чем hBMSC. Как hAMSC, так и hBMSC были способны подавлять пролиферацию аллогенных лимфоцитов периферической крови и снижать секрецию IFN-γ, стимулированную PHA in vitro.