Передовые методы в биологии и медицине
Открытый доступ

Абстрактный

Выделение митохондриальной РНК с обработкой 6-OHDA для определения жизнеспособности клеток генотипа HtrA2 KO/CHOP

Аль-Бараа Акрам Эль-Сайед*

Митохондриальные РНК — это класс малых РНК, которые могут регулировать экспрессию генов посредством вмешательства в процесс трансляции. Было обнаружено, что определенный класс этих микроРНК обогащается вблизи митохондрий и внутри этих органелл, контролирующих поведение митохондрий. РНК в митохондриях организована специальными и безмембранными отсеками РНК-белковых комплексов, называемых РНК-митохондриальными гранулами, которые сокращенно обозначаются как MRG.

Большинство методов, используемых для выделения митохондрий, основаны на дифференциальном центрифугировании, двухэтапном центрифугировании, проводимом на низкой скорости для удаления целых клеток, клеточного и тканевого детрита, а также ядер из целых клеточных экстрактов, за которым следует высокоскоростное центрифугирование для концентрирования митохондрий и отделения митохондрий от других клеточных органелл. Маркер молекулярного контроля качества Hsp60 и маркер контроля качества орган-клеток Atg5. Медикаментозная обработка 6-OHDA вызвала снижение жизнеспособности клеток и продукции АТФ генотипа HtrA2 KO/CHOP. Демонстрация эффекта, зависящего от концентрации dmg, который отражает как жизнеспособность клеток, так и метаболический статус клеток. Медикаментозная обработка 6-OHDA в сочетании с ADEP4 или ACP5 значительно улучшила выживаемость клеток, продукцию АТФ. Указывает на то, что эти препараты могут оказывать защитное действие при повторении пагубных эффектов 6-OHDA. Результаты исследования предоставляют новые доказательства того, что изображение HtrA2 может способствовать увеличению митохондриального стресса и транскрипционной регуляции ядерного стресса, связанного с геном CHOP. Оба участвуют в болезни Паркинсона.