Ферментная инженерия
Открытый доступ

Абстрактный

Олигомеризация, катализируемая папаином в монофазных водно-органических средах - синтез и характеристика нейтральных и полярных аминокислотных олигомеров

Шринивасан СК, Капила С, Дэниел Ф и Нам 

Синтез олигопептидов обычно проводится в водных или двухфазных реакционных средах; использование монофазных реакционных сред довольно ограничено. В этом исследовании гомоолигопептиды лизина (Lys), глицина (Gly), метионина (Met) и тирозина (Tyr) были синтезированы посредством реакции, катализируемой папаином, в монофазных системах, состоящих из ацетонитрила/воды. Условия реакции были оптимизированы для образования пептидной связи и минимизации денатурации фермента. Такие среды особенно привлекательны, поскольку они могут минимизировать вторичный и обратный гидролиз ацильного комплекса и олигопептида соответственно. Синтезированные олигопептиды были очищены и охарактеризованы с помощью обращенно-фазовой жидкостной хроматографии (RPLC) и масс-спектрометрии с ионизацией электрораспылением (ESI-MS). Выходы олигопептидов составили приблизительно 80% для всех аминокислот. Также была исследована стереоспецифичность папаина в средах ацетонитрила/воды. Разделенные энантиомеры метионина были охарактеризованы с помощью хиральной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Результаты показывают, что L-специфичность папаина сохраняется в монофазных средах.