Journal of Fertilization: In Vitro - IVF-Worldwide, Reproductive Medicine, Genetics & Stem Cell Biol
Открытый доступ

Абстрактный

Маршрутизация биомолекул и векторов трансгенов в ядрах ооцитов

Марек Малецки и Бьянка Малецки

Молекулярная архитектура ядерных поровых комплексов (NPC), а также импорт и экспорт молекул через них, интенсивно изучались в различных клетках, включая ооциты. Однако структуры и механизмы, участвующие в транспорте молекул за пределы NPC, оставались неясными до сих пор. Поэтому конкретной целью этой работы было определить, существуют ли какие-либо внутриядерные структуры в континууме с NPC. Эта информация может помочь в объяснении механизмов, которые способствуют распределению биомолекул и векторов внутри клеточных ядер.

Для достижения этой цели мы использовали быструю криоиммобилизацию для захвата молекулярных процессов живых клеток с миллисекундным разрешением. Мы занимались молекулярной визуализацией, включая спектроскопию потери энергии электронов и энергодисперсионную рентгеновскую спектроскопию, чтобы выявить структуры с нанометровым пространственным разрешением. Мы также биоинженерили одноцепочечные вариабельные фрагменты для отслеживания биомолекул и конструкций трансгенов.

Здесь мы раскрываем сети ядерной маршрутизации (NRN) в ооцитах Xenopus laevis. NRN берут начало и простираются от вершин внутриядерных корзин NPC, соединяя их, создавая сложную внутриядерную трехмерную архитектуру. NRN направляют экспорт как тРНК, так и векторов, оснащенных сигналом ядерного экспорта (NES), из ядер. Более того, NRN направляют импорт как нуклеоплазмина, так и векторов модифицированных трансгенов сигналов ядерной локализации (NLS) в ядра. Векторы, оснащенные этими NLS и NES, перемещаются вперед и назад через NPC и NRN.

Подводя итог, мы выявляем NRN, которая функционирует как система направленного распределения в ядрах ооцитов Xenopus laevis . Далее мы приступаем к идентификации ее молекулярных компонентов.