Журнал клеточной науки и терапии
Открытый доступ

Абстрактный

Аутологичный гельзолин в сочетании с экзогенными нуклеотидами усиливает хондрогенную дифференцировку в мезенхимальных стромальных клетках, полученных из жировой ткани лошадей - исследование in vitro

Krzysztof Marycz, Monika Maredziak, Agnieszka Smieszek, Jakub Grzesiak and Anna Siudzinska

Предыстория: В настоящее время ветеринарная практика предполагает лечение заболеваний, связанных с дегенерацией хряща, с использованием передовой терапии, основанной на применении мезенхимальных стромальных клеток. Подготовка клеток к трансплантации требует культивирования in vitro и оценки их хондрогенного потенциала.

Цель : Определить, может ли аутологичный гельзолин, полученный из сыворотки лошади и экзогенных нуклеотидов, усиливать метаболическую активность и хондрогенную дифференцировку мезенхимальных стромальных клеток, полученных из жировой ткани лошадей (EqASC).

Методы: Мезенхимальные стволовые клетки были выделены из подкожной жировой ткани лошади. Стандартная среда роста была дополнена 1% гельзолина или/и 0,1 мг/мл нуклеотидов. Пролиферативная активность клеток была определена на основе результатов, полученных с помощью цитотоксического анализа и анализа слущивания микровезикул. Морфология, цитофизиологическая активность и потенциал хондрогенной дифференцировки были оценены с использованием световой, флуоресцентной и сканирующей электронной микроскопии. Эффекты хондрогенной стимуляции были определены с помощью (i) анализа экспрессии генов для цитоскелета и матричных белков; (ii) гистохимии протеогликанов и (iii) анализа паттерна роста культуры и образования хондро-узелков.

Результаты: Усиление пролиферативной активности было отмечено в культурах, стимулированных экзогенными нуклеотидами. Хотя добавление гельзолина не повлияло на пролиферацию EqASC, оно способствовало целостности цитоскелета. Оба исследованных фактора положительно повлияли на хондрогенную дифференцировку – гельзолин через стабилизацию экспрессии белков цитоскелета, в то время как нуклеотиды через стимулирование образования узелков. Сочетание гельзолина и нуклеотидов усилило пролиферацию клеток, что отразилось в более высокой клеточной активности и отторжении микровезикул, а также повлияло на образование хондроузлов.

Выводы: Аутологичный гельзолин и экзогенные нуклеотиды, внедренные в культуры in vitro мезенхимальных стромальных стволовых клеток, выделенных из жировой ткани, могут усиливать клеточную целостность, пролиферацию и хондрогенную дифференцировку этих клеток, таким образом, напрямую влиять на регенеративный потенциал трансплантатов мезенхимальных стромальных стволовых клеток, полученных из жировой ткани, используемых для лечения остеоартрита у лошадей.