Микобактериальные заболевания
Открытый доступ

Абстрактный

Естественная экспрессия генов, кодирующих основные антигены Rd1 и Rd9 у M. Tuberculosis и других микобактерий

Шумайла Н.М. Ханиф, Раджа Аль-Аттия и Абу Салим Мустафа

Естественная экспрессия генов пяти основных антигенных белков, присутствующих в геномной области различия (RD)1, т. е. pe35, ppeE68, esxA и esxB, и RD9, т. е. esxV, была определена на уровне мРНК и белка в M. tuberculosis, M. bovis BCG и видах микобактерий окружающей среды M.avium и M.vaccae. Экспрессия мРНК была определена с использованием общей микобактериальной РНК и ген-специфических прямых и обратных праймеров в обратной транскрипционно-полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР), а экспрессия белков была определена с помощью вестерн-иммуноблот-анализа микобактериальных соникатов с антисыворотками, содержащими белок-специфические антитела, полученные у кроликов. Кроме того, экспрессия каждого белка в различных субклеточных фракциях M.tuberculosis была изучена с помощью вестерн-иммуноблот-анализа клеточных стенок, культуральных фильтратов и соникатов M.tuberculosis с использованием кроличьих антисывороток. Результаты показали экспрессию мРНК и белков для PE35, PPE68, ESXA и ESXB только в M. tuberculosis, тогда как ESXV был экспрессирован в M.tuberculosis и M.bovis BCG, но ни один из них не был экспрессирован в M.avium и M.vaccae. Кроме того, все белки были обнаружены в различных субклеточных фракциях M. tuberculosis. В заключение, наше исследование демонстрирует, что пять основных антигенных белков, кодируемых генами, присутствующими в регионах RD1 и RD9, естественным образом экспрессируются в M.tuberculosis, тогда как только ESXV экспрессируется в M.bovis BCG, и ни один из этих белков не экспрессируется в экологических видах микобактерий M. avium и M.vaccae. Поскольку эти белки являются основными антигенами, распознаваемыми клетками Th1 защитного фенотипа, они могут быть полезны для специфической диагностики и/или разработки новых вакцин против туберкулеза.