А. Барбати, Л. Чезарини, Р. Пеллегрино, Г. К. Ди Ренцо, Чиа Гренелли
Цель: Измерение мочевого цистатина C (цист-C) может быть очень хорошим способом раннего выявления новорожденных, предрасположенных к нарушению функции почек. PETIA, PENIA и EIA являются иммунометрическими методами, используемыми для количественного определения цист-C в биологической жидкости человека, но они имеют некоторые помехи и не позволяют проводить качественный анализ. Настоящее исследование выполняет валидацию иммуноблота SDS-PAGE для анализа мочевого цист-C.
Методы: моча была собрана у новорожденных в отделении новорожденных больницы S. Maria della Misericordia. Мочевой цист-C был исследован с помощью электрофореза SDS-PAGE, иммуноблота и считывания оптической плотности.
Результаты: качественный анализ показал две различные молекулярные формы: реактивность около 70 кДа во всех образцах и реактивность 13 кДа в ограниченном количестве образцов. Коэффициент вариации для точности анализа составил 10%, а для точности анализа — ± 10%; предел обнаружения составил 0,009 нг/мкл, а калибровочная кривая имеет хорошую линейность (диапазон 0,02-0,3 нг/мкл). Стабильность мочевого цист-С была приемлемой даже без использования ингибиторов протеазы, если анализ проводился на свежесобранной моче или сразу после размораживания образцов, хранившихся до шести месяцев.
Заключение: анализ иммуноблота SDS-PAGE является допустимым методом для получения качественного и количественного анализа мочевого цист-С.