Journal of Fertilization: In Vitro - IVF-Worldwide, Reproductive Medicine, Genetics & Stem Cell Biol
Открытый доступ

Абстрактный

Накопление нестабильности микросателлитов у мышей с нокаутом супероксиддисмутазы-1: возможный предиктор развития зародышевых клеток или опухолегенеза

Гарольд Морено-Ортис, Клара Эстебан-Перес, Элкин Лусена, Нэнси А. Райхерт и Дуэйн А. Уайз

Ген супероксиддисмутазы 1 (Sod1) является одним из защитных механизмов клеток для устранения повреждения реактивными формами кислорода с целью защиты компонентов клеток и предотвращения зародышевой недостаточности или опухолеобразования. Первичные зародышевые клетки мыши представляют собой популяцию клеток, происходящих из проксимального края эпибласта в непосредственной близости от экстраэмбриональной эктодермы, и из которых некоторые клетки дифференцируются в мужские или женские зародышевые клетки. Во время миграции клеток через генитальный гребень первичные зародышевые клетки демонстрируют обширную скорость пролиферации и подвергаются повреждению ROS. При отсутствии антиоксидантных механизмов клеток первичные зародышевые клетки имеют повышенный риск накопления специфических мутаций из-за повреждения свободными радикалами. Мы предполагаем, что во время миграции клеток первичные зародышевые клетки с нокаутом Sod1 накапливают нестабильность микросателлитов, и это может быть сигналом для выбора пула первичных зародышевых клеток, преждевременной недостаточности яичников или опухолевой трансформации. Мы препарировали и изолировали примордиальные зародышевые клетки от мышей штаммов Sod1+/+ (дикий тип), Sod1+/- (гетерозиготный) и Sod1-/- (гомозиготный) (B6; 129S7-Sod1tm1Leb/J) из генитального гребня на 10,5 и 18 день после коитума, чтобы определить и количественно оценить микросателлитную нестабильность в 10 одиночных тандемных повторных маркерах с помощью методов ПЦР на отдельных клетках. Наши результаты показывают, что примордиальные зародышевые клетки от мышей с нокаутом Sod1 накапливали микросателлитную нестабильность в пяти маркерах (4-4-19844, D13mit16, D13mit78, D19mit68 и DXmit249), расположенных вблизи важных генов, участвующих в пролиферации и дифференцировке клеток. В целом, это исследование показывает, что нестабильность микросателлитов напрямую связана с нарушением гена Sod1, которое может вызывать аномальные миграционные характеристики, наблюдаемые в первичных зародышевых клетках, такие как преждевременная зародышевая недостаточность или опухолевая инвазия и метастазирование. В заключение, нестабильность микросателлитов может быть сигналом для выбора пула первичных зародышевых клеток или туморогенеза.