Передовые методы в биологии и медицине
Открытый доступ

Абстрактный

Анализ полиморфизма рецепторов андрогенов человека с использованием метода флуоресцентной петлевой гибридной подвижности

Томокадзу Исикава, Сёичи Мацукума, Мицуё Ёшихара, Тацуо Куросава и Ёхей Мияги

Была введена техника флуоресцентного сдвига петлевой гибридной подвижности (LH-MS) для анализа полиморфных участков в экзоне 1 гена рецептора андрогенов человека. Предполагалось, что петли (CAG)17-31 или (CTG)17-31 выступают из смысловых или антисмысловых цепей продуктов ПЦР после гибридизации с обратными или прямыми зондами LH соответственно. Когда массив мужской ДНК анализировался с использованием зондов LH, меченых Cy5, была установлена ​​уникальная линейная корреляция между длинами повторов CAG и положениями флуоресцентных полос LH на полиакриламидных гелях. Эти линейно смещающиеся паттерны полос использовались для сборки маркеров размера лестницы LH длин повторов CAG. Анализ женской ДНК показал, что 87% женщин гетерозиготны по полиморфизмам повторов CAG, что может быть информативным для анализа клональности опухолей у женщин-онкологических больных. В качестве доказательства принципа гетерозиготная ДНК женской колоректальной опухоли была исследована с помощью флуоресцентной техники LH-MS, и была четко выявлена ​​потеря одного аллеля после обработки чувствительным к метилированию рестрикционным ферментом HpaII.