Микобактериальные заболевания
Открытый доступ

Абстрактный

Клонирование и секвенирование генов туберкулеза Rv0577 и Rv3846 для ДНК-вакцины

Муссарат Касим1, Асифа Хамид2*, Мирза Имран Шехзад1

Туберкулез (ТБ), вызываемый Mycobacterium tuberculosis (M. tb), является основной проблемой здравоохранения во всем мире. Это заразное, широко распространенное заболевание в развивающихся странах, включая Пакистан. Бедность в развивающихся странах делает это заболевание острой проблемой здравоохранения. Почти треть населения мира поражена туберкулезом. Пакистан занимает 5-е место среди стран с наибольшим числом инфицированных туберкулезом. Из 100 000 человек около 280 человек в Пакистане инфицированы этой болезнью. Вакцинация — это способ предотвратить возникновение заболевания. Бацилла Кальметта-Герена (БЦЖ) является единственной лицензированной вакциной против туберкулеза во всем мире. Однако защитный иммунитет, вырабатываемый с помощью этой вакцины, различается в разных частях мира. Следовательно, необходимо разрабатывать новые противотуберкулезные вакцины на основе ДНК на основе информации, полученной при секвенировании всего генома Mycobacterium tuberculosis , поскольку ДНК-вакцины способны вызывать как гуморальный, так и клеточный иммунный ответ. В настоящих исследованиях мы выбрали два гена Mycobacterium tuberculosis Rv0577 и Rv3846 для разработки ДНК-вакцины. Эти гены были амплифицированы с помощью ПЦР, подтверждены с помощью рестрикционного расщепления, лигированы в вектор pTZ57R/T, трансформированы в клетки DH5α. Клоны были подтверждены с помощью рестрикционного расщепления и анализа последовательности. В будущем эти клоны могут быть использованы для субклонирования в векторы экспрессии млекопитающих и испытаны в качестве ДНК-вакцин на мышиной модели.