Ферментная инженерия
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低分子量蛋白酪氨酸磷酸酶控制天蓝色链霉菌A3（2）的抗生素生产

Sujata Vijay Sohoni、Sarah Lieder、Prashant Bapat、Ivan Mijakovic 和 Anna Eliasson Lantz

天蓝色链霉菌 A3(2) 具有低分子量蛋白酪氨酸磷酸酶 (LMW-PTP) PtpA，它会影响十一烷基原红蛋白 (RED) 和放线菌素 (ACT) 的产生。在本研究中，我们确定了另一种 LMW-PTP，称为 sco3700。使用对硝基苯基磷酸盐和枯草芽孢杆菌的酪氨酸磷酸化蛋白 PtkA 作为底物，确定了纯化的 Sco3700 的酪氨酸磷酸酶活性。Sco3700 磷酸酶活性的最适 pH 为 6.8，pNPP 的 KM 为 14.3 mM，而 PtpA 的最适 pH 为 6.0，KM 为 0.75 mM。研究了 Sco3700 与 PtpA 一起参与调节天蓝色链霉菌抗生素生产的潜力。因此，构建了具有 ptpA 和 sco3700 过表达的 S. coelicolor A3(2) 菌株，并对其生长、RED 和 ACT 产量进行了表征。我们确实观察到 ptpA 过表达菌株中 ACT 的体积生产力增加。此外，当 ptpA 过表达时，观察到 ACT 生产的开始时间明显提前。Sco3700 过表达对细胞具有多效性影响，并且该菌株表现出较低的生产力和抗生素的最终浓度。我们得出结论，Sco3700 确实是一种酪氨酸磷酸酶，它有助于调节 S. coelicolor 中的抗生素生产，影响抗生素生产的开始时间。