Журнал гликомики и липидомики

Журнал гликомики и липидомики
Открытый доступ

ISSN: 2153-0637

Абстрактный

Сайт-специфическая классификация N-связанных олигосахаридов внеклеточных областей рецептора Fcγ IIIb, экспрессируемых в клетках почек детеныша хомяка

Коичи Като

Рецептор Fcγ III человека (FcγRIII) состоит из двух изоформ, которые кодируются двумя отдельными генами: трансмембранным FcγRIIIa и связанным с гликозилфосфатидилинозитолом FcγRIIIb. Обе изоформы могут существовать в виде растворимой формы (sFcγRIII), которая состоит из их внеклеточной области, полученной путем протеолитического расщепления. Иммунологические функции, опосредованные FcγRIII, такие как антителозависимая клеточно-опосредованная цитотоксичность и фагоцитоз, критически зависят от N-гликозилирования молекул FcγRIII. В нашем предыдущем исследовании профилирование на основе высокоэффективной жидкостной хроматографии показало, что N-связанные олигосахариды, высвобождаемые из аллеля NA2 человеческого sFcγRIIIb, экспрессируемого в клетках почек детеныша хомяка, состоят из олигосахаридов с высоким содержанием маннозы и олигосахаридов сложного типа с фукозилированием ядра. В данной работе мы успешно классифицировали N-гликаны этого гликопротеина по этим двум типам в каждом из шести участков N-гликозилирования с помощью тандемного анализа масс-спектрометрии с использованием жидкостной хроматографии (ЖХ) и электрораспыления в сочетании с обработкой эндогликозидазой. Наши результаты показали, что четыре сайта sFcγRIIIb, Asn38, Asn74, Asn162 и Asn169, экспрессировали только олигосахариды сложного типа, в то время как оставшиеся два сайта, Asn45 и Asn64 (оба не сохраняются в аллеле NA1), были заняты не только олигосахаридами сложного типа, но и олигосахаридами с высоким содержанием маннозы, которые, как считается, участвуют во взаимодействии FcγRIIIb с рецептором комплемента типа 3. Вместе с ранее опубликованным сайт-специфическим профилированием N-гликозилирования рекомбинантного sFcγRIIIa, это исследование подчеркивает, что как sFcγRIIIa, так и sFcγRIIIb, полученные в различных производственных средах, экспрессируют фукозилированные ядром олигосахариды сложного типа в качестве основных гликоформ в Asn74 и Asn162. Эти результаты дают представление о разработке и создании терапевтических антител, поскольку N-гликан Asn162 вносит значительный вклад в связывание иммуноглобулина G.

Отказ от ответственности: Этот тезис был переведен с использованием инструментов искусственного интеллекта и еще не прошел рецензирование или проверку.
Top