Журнал клинической и клеточной иммунологии
Открытый доступ

Абстрактный

Адоптивный перенос дендритных клеток, экспрессирующих лиганд Fas, модулирует воспаление кишечника в модели воспалительного заболевания кишечника

Эдельмари Ривера де Хесус, Рэймонд А. Исидро, Мирелла Л. Круз, Гарри Марти, Кэролайн Б. Эпплярд

Предыстория: Воспалительные заболевания кишечника (ВЗК) являются хроническими рецидивирующими воспалительными состояниями неизвестной причины и, вероятно, являются результатом потери иммунологической толерантности, что приводит к чрезмерной активации иммунной системы кишечника. Кишечные макрофаги и дендритные клетки (ДК) необходимы для поддержания толерантности, но также могут способствовать воспалительной реакции при таких состояниях, как ВЗК. Современные методы лечения ВЗК ограничены высокой стоимостью, нежелательной токсичностью и побочными эффектами. Возможность уменьшения воспаления кишечника с помощью ДК, генетически модифицированных для сверхэкспрессии апоптоз-индуцирующего FasL (FasL-ДК), еще не изучена.
Цель: Исследовать иммуномодулирующий эффект введения FasL-ДК в модели острого колита у крыс с тринитробензолсульфоновой кислотой (TNBS).
Методы: Экспрессия FasL на ДК, выделенных из брыжеечных лимфатических узлов (МЛУ) нормальных и крыс с колитом TNBS, определялась с помощью проточной цитометрии. Первичные крысиные DC костного мозга были трансфицированы крысиной плазмидой FasL (FasL-DC) или пустым вектором (EV-DC). Влияние этих DC на секрецию IFNγ Т-клетками и апоптоз определяли с помощью ELISPOT и проточной цитометрии для аннексина V соответственно. Крысы получали FasL-DC или EV-DC внутрибрюшинно за 96 и 48 часов до индукции колита с помощью TNBS. Инфильтрация Т-клеток и нейтрофилов толстой кишки определялась с помощью иммуногистохимии для анализа активности CD3 и миелопероксидазы соответственно. Количество и фенотип макрофагов измеряли с помощью двойной иммунофлуоресценции для CD68 и индуцируемой синтазы оксида азота.
Результаты: дендритные клетки MLN от нормальных крыс экспрессировали больше FasL, чем от крыс с колитом. По сравнению с EV-DC, FasL-DC снижали секрецию IFNγ Т-клеток и увеличивали апоптоз Т-клеток in vitro. Адоптивный перенос FasL-DC снизил макроскопические и микроскопические показатели повреждения и уменьшил количество Т-клеток толстой кишки, нейтрофилов и провоспалительных макрофагов по сравнению с адоптивным переносом EV-DC.
Заключение: FasL-DC эффективны при лечении воспаления толстой кишки в этой модели ВЗК и представляют собой возможное новое лечение для пациентов с ВЗК.