Журнал противовирусных и антиретровирусных препаратов
Открытый доступ

Абстрактный

Человеческие моноклональные Fab-антитела против вируса Западного Нила и его нейтрализующая активность, проанализированная in vitro и in vivo

Тао Дуань, Моника Фергюсон, Линьтянь Юань, Фанлин Сюй и Гуанъюй Ли

Прогрессирование заболевания при заражении вирусом Западного Нила (ВЗН) у людей приводит к менингиту или энцефалиту и может привести к смерти, особенно среди пожилых и иммунодефицитных лиц. Пассивный иммунитет с использованием иммуноглобулинов показал эффективность при лечении некоторых пациентов с инфекцией ВЗН, что делает разработку человеческих антител против ВЗН значимой. Целью данного исследования было создание библиотеки специфичных для Fab фаговых дисплеев против ВЗН, а также выявление и отбор клонов с нейтрализующей активностью. Общая РНК была извлечена из лимфоцитов периферической крови (ЛПБ) двух иммунизированных лиц, и ОТ-ПЦР использовалась для амплификации фрагментов Fab, содержащих тяжелые (VH) и легкие (VL) цепи. Амплифицированные гены были последовательно клонированы в вектор экспрессии рекомбинантных антител pComb3-H, а библиотека специфичных для Fab фаговых дисплеев была упакована с фагом-помощником VCS-M13. Было проведено пять раундов пэннинга с доменом III белка E вируса Западного Нила, а затем с помощью ИФА были отобраны связывающие антитела.