Питер Тиммс
Популяции диких коал продолжают испытывать серьезное снижение в результате нескольких угрожающих факторов, включая: потерю среды обитания, травмы, полученные в результате дорожно-транспортных происшествий, нападения собак и хламидийное заболевание. Хламидийные инфекции связаны с заболеваниями, начиная от глазных заболеваний, приводящих к слепоте, а также заболеваний мочевыводящих путей и половых путей, приводящих к женскому бесплодию. Моделирование показывает, что борьба с хламидийными заболеваниями окажет значительное влияние на стабилизацию сокращения популяции. Наши предыдущие исследования показали, что коал можно безопасно иммунизировать вакциной, содержащей смесь антигенов главного наружно-мембранного белка хламидий (MOMP) в сочетании с однократным или трехкратным подкожным введением. Недавно в ходе крупномасштабного полевого испытания вакцины мы вакцинировали 30 коал, которые были внешне клинически здоровы, но либо имели отрицательный или положительный результат ПЦР на хламидии, либо имели положительный результат ПЦР на хламидии, и наблюдали за ними в течение 1-2 лет, чтобы оценить защитный эффект вакцины (по сравнению с контрольной группой невакцинированных коал). Мы наблюдали сильные, специфические и длительные иммунные реакции у вакцинированных коал; реакции антител с высоким титром (измеренные с помощью ИФА, а также нейтрализации in vitro), а также реакции цитокинов, специфичных для хламидий (в частности, интерферон-гамма и ИЛ-17). Мы также наблюдали защиту от прогрессирования клинического заболевания у вакцинированных животных. Мы также провели небольшое исследование по вакцинации животных, у которых уже были клинические признаки глазного заболевания. Вместо обычной практики введения антибиотиков (хлорамфеникол, ежедневно в течение 28 дней, что серьезно нарушает микробиом кишечника животного) мы вакцинировали четырех животных однократной дозой вакцины 3-МОМП. Выявление вируса проводилось с использованием 44 мазков из носоглотки. Около 57% сывороток, проверенных в лаборатории, оставались положительными на иммуноглобулин М, а 95% смывов были положительными с помощью ПЦР с обратной транскриптазой. Филогенетический анализ последовательностей, полученных из 30 образцов мазков, показал циркуляцию двух вариантов генотипа D8, но ни одного штамма генотипа D4, как было обнаружено в 2007 году. У всех вакцинированных животных их ПЦР-нагрузка хламидий снизилась, часто до нуля, и по крайней мере у двух животных мы наблюдали снижение клинического показателя заболевания. Эти результаты являются многообещающими для будущей разработки эффективной хламидийной вакцины для использования как у содержащихся в неволе, так и у диких коал.Популяции диких коал продолжают иметь значительные уровни заражения C. pecorum и в результате страдают от изнуряющей болезни, которая угрожает их долгосрочному выживанию. Во многих популяциях эти уровни заражения и заболевания на самом деле выше, чем сообщалось ранее, и текущие варианты лечения оказывают незначительное или никакое влияние на снижение уровня заражения и заболевания, при этом записи о госпитализации остаются стабильными с течением времени. Широкое внедрение вакцины у диких коал может обеспечить защиту, необходимую для обращения этого прогрессирования вспять. На сегодняшний день предыдущие испытания вакцины на основе белка rMOMP, проведенные как на инфицированных, так и на больных популяциях диких коал, были очень успешными. Эти испытания показали, что вакцина на основе белка rMOMP стимулирует иммунную систему и отвечает за увеличение нейтрализующих антител. Вакцинированные коалы показали снижение хламидийной инфекционной нагрузки, а также статуса глазного заболевания после вакцинации и, что важно, вакцинированные rMOMP дикие коалы также показали снижение прогрессирования заболевания в течение 12-месячного периода. Однако, несмотря на этот успех, существует множество проблем в производстве и внедрении вакцины в формате рекомбинантного белка в более широких масштабах. Вакцина на основе синтетического пептида могла бы преодолеть некоторые из этих проблем, предполагая, что она вызывает сильный и соответствующий иммунный ответ. Разработка противохламидийной вакцины на основе пептида, которая может вызывать такой же или даже более сильный иммунный ответ, как и текущая вакцина C. pecorum MOMP, с потенциалом для массового производства, была бы идеальным кандидатом для будущей разработки противохламидийной вакцины. В этом исследовании мы показали, что вакцина, состоящая из двух относительно коротких пептидов, полученных из полноразмерного MOMP, способна вызывать иммунный ответ у коал в течение 26 недель после вакцинации. Мы показали реакцию антител IgA слизистой оболочки на полноразмерный rMOMP (G) как у коал, вакцинированных пептидом MOMP, так и белком MOMP. Инфекция и заболевание хламидиями являются эндемичными для свободно гуляющих коал. Антибиотики остаются основным методом лечения хламидиоза у коал, несмотря на показатели неэффективности лечения и неблагоприятные исходы дисбактериоза кишечника. При более тяжелых проявлениях заболевания, требующих вмешательства антибиотиков, эффект вакцинации во время использования антибиотиков в настоящее время неизвестен. В этом исследовании изучалось, может ли быть вызван продуктивный иммунный ответ путем вакцинации коал во время лечения антибиотиками цистита, вызванного хламидиозом. Уровни антител IgG в плазме против основного внешнего мембранного белка C. pecorum (MOMP) снизились во время лечения антибиотиками как у вакцинированных, так и у невакцинированных коал. После лечения уровни IgG восстановились. Антитела IgG от естественно инфицированных, вакцинированных коал распознали большую долю белка MOMP по сравнению с их естественно инфицированными, невакцинированными аналогами. Кроме того,Экспрессия генов мононуклеарных клеток периферической крови выявила повышение регуляции генов, связанных с дегрануляцией нейтрофилов у вакцинированных коал в течение первого месяца после вакцинации. Эти результаты показывают, что вакцинация коал во время лечения антибиотиками от цистита может привести к формированию продуктивного иммунного ответа в форме увеличенной и расширенной продукции IgG.